抗體
可(kě)在不同的(de)液體中，包括血清或唾液等複雜(zá)的(de)液體中，對(duì)抗體-抗原相互作用(yòng)和(hé)進行動态測量。
 
SPR用(yòng)于抗體的(de)表征
SPR是一個(gè)敏感的(de)平台，可(kě)以确定抗體或片段與抗原的(de)相互作用(yòng)，并直接測量相互作用(yòng)的(de)親和(hé)力和(hé)動力學。SPR儀器還(hái)可(kě)以直接測量脂質體和(hé)活細胞等相關目标分(fēn)子，并且反應其自然狀态下(xià)的(de)相互作用(yòng)。可(kě)以在不同的(de)液體中進行其相互作用(yòng)測量，包括100%的(de)血清，血漿或細胞生長(cháng)介質等。SPR提供了(le)抗體的(de)構象和(hé)方向的(de)一些信息。
 
選擇SPR用(yòng)于抗體的(de)表征的(de)優勢
1. 免标記的(de)親和(hé)力和(hé)動力學測試
2. 低成本
3. 抗體構象變化(huà)
4. 天然樣品（100%血清）
5. 生物(wù)制藥，甚至來(lái)自于細胞介質的(de)藥
6. 簡單地準備表面傳感器
 
SPR可(kě)以回答(dá)的(de)關于抗體的(de)關鍵問題
1. 抗體與抗原的(de)親和(hé)力和(hé)結合動力學參數
2. 用(yòng)于免疫分(fēn)析的(de)最佳抗體是什(shén)麽?
3. 在脂質環境中與受體結合最佳的(de)抗體是什(shén)麽?
4. 在活細胞中哪個(gè)細胞信号是由抗體激活的(de)?
5. 分(fēn)子X與Y的(de)結合和(hé)離解動力學有多(duō)快(kuài)?
6. 哪一種單克隆抗體具有最高(gāo)的(de)親和(hé)力?
 
用(yòng)SPR測量的(de)抗體和(hé)抗原相互作用(yòng)
蛋白質-抗體相互作用(yòng)是制藥工業和(hé)蛋白質研究領域的(de)重要研究領域。基于抗體的(de)生物(wù)技術藥物(wù)已被證明(míng)是治療幾種頑固性疾病的(de)有效方法。SPR是決定分(fēn)子相互作用(yòng)的(de)靈敏工具。實時(shí)和(hé)标簽自由測量不僅提供了(le)有關親和(hé)力的(de)信息，還(hái)提供了(le)研究系統動力學的(de)信息。各種固定的(de)固定協議(yì)可(kě)以用(yòng)來(lái)在傳感器表面上黏合分(fēn)子，因此方法适用(yòng)于廣泛的(de)分(fēn)子。人(rén)類血清白蛋白(HSA)被固定在羧甲基葡聚糖(CMD)傳感器表面，與胺偶聯化(huà)學反應。測定了(le)人(rén)類血清白蛋白抗體(抗HSA)與固定HSA的(de)相互作用(yòng)。通(tōng)過對(duì)四種不同的(de)抗hsa濃度的(de)相互作用(yòng)，計算(suàn)了(le)該結合的(de)親和(hé)力和(hé)動力學。正如預期的(de)抗HhasHSA緊密結合，複雜(zá)的(de)離解率非常慢(màn)。
 
結合動力學的(de)抗體
pkc(蛋白激酶c)與癌症、II型糖尿病和(hé)阿爾茨海默氏病有關。因此，pkc的(de)抑制劑和(hé)激活劑有望用(yòng)于研究和(hé)藥物(wù)開發。Llama單鏈抗體(VHHs)是一種新的(de)單克隆抗體，可(kě)以特别激活或抑制人(rén)類的(de)pkc。在标準的(de)金傳感器上，羧甲基化(huà)的(de)葡聚糖水(shuǐ)凝膠是自合成的(de)。用(yòng)SPR測量了(le)動力學，并對(duì)SPR進行了(le)跟蹤分(fēn)析。測量以固定角度模式進行。在此過程中，采用(yòng)了(le)一階或二階階的(de)朗缪爾綁定模型，并确定了(le)關聯和(hé)解離常數。用(yòng)SPR測定的(de)pkc激酶的(de)活化(huà)和(hé)抑制動力學與體内的(de)pkca HeLa細胞的(de)轉位有良好的(de)相關性。結果表明(míng)，将VHHs與pkc構象結合，因此在SPR測量中，蛋白質定位的(de)作用(yòng)是重要的(de)。