小分(fēn)子藥物(wù)

由于具有高(gāo)質量動力學的(de)純動力學特性,SPR是一種直接測量小分(fēn)子的(de)強大(dà)而靈敏的(de)工具。
 
SPR用(yòng)于小分(fēn)子相互作用(yòng)
SPR作爲一種敏感的(de)平台,可(kě)以決定藥物(wù)-靶向相互作用(yòng),對(duì)于小分(fēn)子同樣适用(yòng)。可(kě)以顯示實時(shí)的(de)無标記親和(hé)性和(hé)動态的(de)相互作用(yòng)檢測。針對(duì)不同的(de)分(fēn)析物(wù)(核苷酸、肽、藥物(wù)分(fēn)子、抗體、病毒等)優化(huà)不同的(de)配體(蛋白質、核苷酸、肽、受體、膜受體、抗體等)。其相互作用(yòng)的(de)測量可(kě)以在不同的(de)液體中進行,包括複雜(zá)的(de)液體,如血清,唾液或有機溶劑。
 
選擇SPR來(lái)測量小分(fēn)子的(de)5個(gè)理(lǐ)由:
1. 直接測量小分(fēn)子
2. 通(tōng)過動力學可(kě)以得(de)到高(gāo)質量的(de)數據
3. 低成本
4. 很容易從靶向研究向内部化(huà)研究轉變
5. 應對(duì)生物(wù)制藥發展和(hé)制造業的(de)新挑戰
 
關于SPR可(kě)以回答(dá)的(de)關于小分(fēn)子的(de)4個(gè)關鍵問題:
1. 小分(fēn)子藥物(wù)與蛋白質的(de)親和(hé)力是多(duō)少?
2. 分(fēn)子X與分(fēn)子Y相互結合和(hé)解離的(de)速度有多(duō)快(kuài)?
3. 哪種藥物(wù)分(fēn)子是最好的(de)結合受體?
4. 藥物(wù)從材料中的(de)釋放的(de)速率是多(duō)少?
 
DNA定量檢測應用(yòng)
DNA檢測可(kě)以用(yòng)于檢測遺傳物(wù)質,以檢測基因突變、突變、基因轉染或來(lái)自大(dà)量樣本的(de)物(wù)種。通(tōng)過對(duì)超過20個(gè)核苷酸的(de)特定單鏈寡核苷酸進行分(fēn)析,可(kě)以從大(dà)量遺傳物(wù)質中檢測和(hé)量化(huà)獨特的(de)基因序列。27個(gè)單位的(de)寡核是自吸附在一個(gè)标準的(de)黃(huáng)金感應表面上的(de)。使用(yòng)一種(2-羟基乙基)-脂酰胺分(fēn)子,在表面上吸附了(le)非特異性結合。對(duì)具有互補序列的(de)單鏈dNA樣品進行了(le)檢測,并對(duì)相同的(de)透鏡和(hé)牛血清白蛋白(BSA)的(de)非互補dNA進行測試。Sensby SPR在廣泛的(de)濃度範圍(0.1nM至10μM)中表現良好非互補dNA和(hé)1000nM的(de)BSA無信号響應。
 
藥物(wù)與細胞的(de)相互作用(yòng)應用(yòng)
體外細胞檢測在藥物(wù)研發過程中被廣泛使用(yòng)。通(tōng)常來(lái)說,這(zhè)些需要标記的(de)材料,是基于紫外線、熒光(guāng)或質譜分(fēn)析的(de)後發現。多(duō)參數的(de)SPR能夠實時(shí)測量在未标記的(de)情況下(xià)的(de)交互,在一個(gè)恒定的(de)和(hé)控制的(de)流動條件下(xià)。SPR測量寬角度範圍和(hé)整個(gè)SPR曲線,可(kě)以觀察幾個(gè)參數。madin-darby犬腎髒(MDCKII)細胞單層細胞沉積在黃(huáng)金傳感器幻燈片上。成功地測定了(le)小分(fēn)子體重藥物(wù)普萘洛爾醇和(hé)d-mannitol與細胞單層細胞的(de)相互作用(yòng)。在刺激後,部分(fēn)普萘洛爾仍留在細胞層,而d-甘尼醇被移除。通(tōng)過對(duì)SPR的(de)測量,甚至可(kě)以區(qū)分(fēn)準細胞和(hé)細胞外藥物(wù)吸收路徑。
 
用(yòng)SPR測量小分(fēn)子量藥物(wù)蛋白相互作用(yòng)
SPR可(kě)以測量一種小分(fēn)子量藥物(wù)與人(rén)類血清白蛋白(HSA)的(de)相互作用(yòng)。HSA被連接到一個(gè)帶有胺耦合化(huà)學的(de)傳感器表面。通(tōng)過SPR,确定了(le)力壓的(de)親和(hé)力(KD)和(hé)動力學常數(ka和(hé)KD)。利用(yòng)動力學,将體積效應與結合動力學分(fēn)離開來(lái),确保了(le)優質的(de)動力學數據。